Sraženina imunitní komplexy. Interakce domény řetězce protilátky

stát agregace imunitních komplexů by neměla interferovat s fixačním Fc-fragmentu složky komplementu, a v důsledku toho jejich šíření ve sraženině. Zkoumání struktury konkrétní sraženina protilátek s antigeny, bylo provedeno pomocí spin štítků (Grigoryan et al., 1969). Pro značení proteinu za použití nitroxylový radikál syntetizovány na základě maleimidu. To kovalentně reagovat s SH-skupiny králičí protilátkou po redukci s 2-merkaptoethanolem disulfidických vazeb. Když byla tato aktivita protilátky zachována.

V důsledku toho, srážky Protilátky spin-značené ovalbumin štítek nadále volně otáčet, aniž by docházelo sterickou zábranu. Na druhé straně, nespecifické ukládání protilátek spin značené síranem amonným za následek silné imobilizace značek. Tyto údaje poukazují na mřížce, volná struktura sraženiny imunokomplexů.

Při pokusech za použití metoda cirkulární dichroismus byly zjištěny rozdíly ve spektrech tří homologních antipnevmokokkovyh protilátek před a po jejich interakci se specifickými ligandy-geksasaharidny (Jaton e. a., 1975a). Zkoumané změny ve spektrech homologní rekombinanty hybridních a L-a H řetězce pod vlivem haptenu. Homologní rekombinantní protilátky měly spektrum identické se spektrem nativní protilátky, i přes absenci meziřetězcové S-S vazeb.

Změny ve spektrech dochází po navázání haptenu ve všech třech nativních protilátek, Fab fragmentů a homologních rekombinantních molekul. Nicméně, neexistuje žádný důkaz o konformačních změn na interakci haptenu s getsrologichnymi rekombinantní protilátky. Tyto výsledky jsou potvrzeny změnou fluorescence kvantový výtěžek protilátek. Ukazují na vysoké specifičnosti meziřetězcové interakce v imunoglobuliny.

Unikátní informační V interakční doménu v řetězci mohou být získány spin štítku. Tato informace závisí na vazebné místo proteinu. Odpovídající aminokyselinový zbytek (nebo zbytků), ke které dochází vazby štítek je určena jeho chemické struktuře a označování podmínek (např., Fenyl). V naší práci (Kaivarainen, Nezlin, 1967a), proteiny označeny dvěma iminoxyl radikály: 2,2,6,6-tetramethyl-4-amino (N-dichlortriazinu) - R, a imidozolidom (2,2,5,5-tetramethyl -1-oksilpirollin-4-karboxylová kyselina) - R2. V závislosti na podmínkách přistoupení známek mohli komunikovat s lysin nebo histidin.

EPR spektrum štítků R, a R2 konjugované pravděpodobně zda ziny zbytků proteinů se skládala ze tří úzkých charakteristického pro slabě immobizirovannoy značek, aniž by docházelo Steri-ically zakrývat makromolekule. Naproti tomu, tyto spektra EPR spektra imunoglobulinu G, označené R, (pravděpodobně přistoupením histidinových zbytků) se skládá z pěti složek.
takový spektra ukazují schopnost označení, které se ve dvou různých mikroprostředí - A a B, které se liší v mikroviskozity.

Podobnost EPR spekter IgG a různé podjednotky jsou zřejmě způsobeny společný pro všechny tyto konstrukční prvky, a to, domény, a jejich interakce. Tento předpoklad je potvrzen skutečností, že proteolýza izolované domén L-řetězce A-složky spektra odpovídající štítku imobilizovaný, zcela zmizí. Je důležité poznamenat, že, v závislosti na fyzikálně-chemické a imunochemické metody polovinu L-řetězců (domény) zachování jejich hlavní prostorová struktura vlastní jim složení intaktních L-řetězce.

Při pokusech na Interakce spin-značený Rt Histidinové zbytky na protilátek s antigeny izolované s použitím králičí anti-humánní hemoglobin, protilátku anti-hovězího IgG a oslí anti-lidský IgG. Podle našich experimentálních etiket rotace byly spojeny zejména Fab-fragmenty. Vzor změn EPR spektra protilátek spin-značený tím, že reaguje s antigeny není závislá na tom, zda a vyloučí se sraženina.

Ve všech zkoumaných případech, komplexaci Protilátky spin-značených antigenů za následek zvýšení poměru oblasti složky A do prostoru centrálního složky vzhledem ke kontrolnímu ESR spektra. Dále došlo k posunu A-složka odpovídající zvýšení imobilizační značky v A stavu. Vzhledem k tomu, oblast složky A je dána množstvím štítku v tomto stavu, jeho zvýšení znamená zvýšení množství značky v takovém stavu nebo zvýšení životnosti tohoto stavu.