GuruHealthInfo.com

Použití leucin, fenylalanin metabolismus posoudit protein

Intravenózní infuzí po dobu 4-6 hodiny obohacený L- [1-13C] leucinu (> 95% 13C) se stal způsob hodnocení výběr kinetika protein v lidském těle. Vzhledem k tomu, leucin je esenciální aminokyselina, zdroj volného neznačeného leucinu přítomný v plazmě může být pouze exogenní leucin požití s ​​jídlem nebo intravenózně (I), nebo bez leucinu, což z rozštěpení bílkovin (B) v těle.
Tak, R = I + V. Na druhé straně, leucin může podrobit pouze oxidaci (na CO2 a močovina), nebo protein, podílející se na syntéze (S, uvolnění nebo neoxidační leucin, Nold).

Během infuze [13C] leucin značený leucin molekuly bobtnat volný leucin tah, opakování cesta neznačeného leucin molekuly. Oxidací [13C] leucinu se objeví ve vydechovaném vzduchu 13CO2, a proteosyntézy, což vede k inkorporaci [13C] leucinu do proteinu v organismu.

rozpouštění [13C] leucin do přírodní bazén s názvem leucin jeho obohacení, protože [13C] leucinu již v malých množstvích a pouze stopové množství infuze vede ke zvýšení leucin bazénu přes původní obsah v těle existuje. Ve stabilním stavu 13C-obohacení bazénu volného leucin rychlosti infuze odráží poměr [13C] leucinu (i) Ra na leucin.

Tak, R (mikromol / kg / min) se může vypočítat z ředicího [13C] leucinu. R a = i [(Ei / Ep) - 1], kde Ei a EP (v přebytku, mol%) - 13 C-obohacení přivedeného roztoku a plasmě (v tomto pořadí) ve stabilním stavu, a i - stopa rychlost infuze (mmol / kg / min). Vzhledem k tomu, Ra = I + B, pak B = Ra - I. Je-li přijat stav konstantní koncentraci leucinu po celou dobu experimentu Ra = Rd. Sběrem vydechovaný vzduch může být určen leucin oxidace (ox).

Displej zahrnující syntézu leucin protein může být vypočtena podle vzorce: Nold = Ra - Ox. Všechny údaje pak mohou být extrapolovány určit absolutní rychlost syntézy, oxidaci a štěpení celkové tělesné proteinu (g bílkovin / kg / den), protože je známo, že 1 g tělesné proteinu obsahuje 610 mikromolů leucin. Infuze [13C] leucin nutné instalovat dva intravenózní katetry: jedno (krátký) katetr se obvykle přivádí do antekubitální žíly pro podání radioaktivně značeného [13C] leucin, ostatní - v kontralaterální povrchové žíly pro krevních testů.

Během infuze izotopů ruka se nachází na vyhřívanou podložku pro vytvoření efektu „arterializované žilní krve“, který je určen, aby přesněji odrážet změny v arteriální krvi smíšené.

Leucin v hodnocení metabolismu bílkovin
Použití [13C] leucinu vyhodnocení metabolismu proteinů u lidí.
Nold - neoxidační uvolňování leucin;
IFR - totální parenterální výživa.

Některé z předpokladů modelu [13C] leucinu:
- Nepřítomnost účinku izotopu
- Nedostatek účinku metabolického stopovací látky vstřikuje
- frakce vyrobené 13CO2, který se redukuje při dýchání je známa
- Absence „recyklovaných“ stopovací
- Výsledek pro stopovací látky (i v případě, kdy jeden značený oxid) je ekvivalentní konci molekuly
- Poole leucin v plazmě odráží intracelulární bazénu

leucin model je založen na několika předpokladech, z nichž většina stála dvě dekády intenzivní inspekce a potvrdil jejich přesnost. Například, není pochyb o tom, že syntéza bílkovin není v plazmě a v intracelulárním prostoru.

Je pravda prekurzor syntéza leucin protein tRNA vázaný leucin, shromažďování a vyhodnocování izotopu v intracelulárním prostoru předpokládá etické a technické problémy spojené s přijímáním jako bioptického a provádět časově náročný proces extrakce intaktní tRNA vázané leucinu. Místo toho, akumulace je hodnocena izotopem bazénu-ketoisocaproate (KIC), ketokyselin leucinu, který může být nazýván náhradou za kaluže tRNA-vázaného leucinu.

během infuze [13C] leucinu Okamžitě transaminiruetsya v kyselině keto (13C-KIC), které spadají do intracelulárního prostoru a je známo, že KIC je ve volném rovnováze s plazmy inovačního společenství. Vzhledem k tomu, KIC se získává pouze z leucinu a vyrábí pouze intracelulárně 13C KIC může působit jako vhodný náhrada za intracelulární bazénu leucin. číslo 13C-KIC lze snadno identifikovat. Bylo zjištěno, že akumulace v plazmě 13KIS-C se vyskytuje asi u 10 až 20% nižší, než akumulace leucinu. Studie tkáňových biopsií, provedených za účasti lidí a použití více značených atomů inovačního společenství a leucin, jakož i studie na zvířatech ukázaly, že KIC je spolehlivým odrazem použití leucinu prekurzoru bazénu pro syntézu proteinů. Akumulační (obohacení) izotopu byly hodnoceny pomocí hmotnostní spektrometrie technologií.

IRMS se používá pro stanovení velmi malou akumulaci (špičatosti < 0,01 моль%) в относительно чистых газах (например, накопление 13C ve vydechovaném CO2), Zatímco plynová chromatografie-hmotnostní spektrometrie byla použita pro stanovení další významné úspory (špičatosti > % 0,1 mol) v organických molekul v komplexních struktur (jako je plazma leucinem nebo KIC). A konečně, plynová chromatografie-kombustion-izotop poměr hmotnostní spektrometrie v sobě spojuje schopnost rozlišovat mezi více GC „vrcholy“ v plazmě s IRMS určit velmi malé úspory. V tomto přístupu je plynová chromatografie se používá pro oddělení organických molekul v komplexních struktur (např. Leucin v plazmě), kdy se přemění molekula zájmu "on-line" čistý plyn (např., CO2 při teplotě 800 ° C ve spalovací peci) v budoucnosti již podrobeny analýze za použití plynu jako IRMS.

K vyhodnocení oxidace leucin Musíte držet nepřímou kalorimetrií na účet pro celou produkci CO2 a odběr vzorků vzduchu z obou větracího kapotu az výdechu obvodu, pokud je pacient na ventilátor, aby posoudila 13CO2-obohacení. Jako využití, vytvořený na metabolických procesů 13CO2 se nerovná krátkého časového infuzního izotopu ke korekci neúplné potřeby obnovení korekční faktor. Dokonce i v případech, popsaných v literatuře, kdy byla obnova hodnocena na 80% a v ideálním případě by byly identifikovány pro každou studovanou populaci nebo klinického případu, protože jeho hodnota se může měnit. Jedním ze způsobů stanovení - vedení krátká (do 2 hodin) infuzní značený roztok hydrogenuhličitanu sodného bezprostředně před podáním značeného leucinu.

Další výhodou tohoto přístupu je, poskytnout odhady CO2 bez držení nepřímé kalorimetrie.

Air Collection na dech Jedná se o složitý proces, proto byla navržena nová studie designu. Takže, jak leucin oxidace nakonec vede k nevratné ztrátě aminokyselin, někteří výzkumníci hodnotí oxidaci [13C] leucinu stanovením močového vylučování dusíku při infuzního roztoku [13C] leucinu bez odběru vzorků vzduchu.

Alternativně, místo označené leucin To by mohlo být podávány značeného fenylalanin. Vzhledem k tomu, že je esenciální aminokyselina, jejího metabolismu je podobný metabolismu leucinu. Jediný rozdíl - zavedení L- [kruhově2H4] Fenylalanin přímý produkt oxidace je L- [kruhově2H4] Tyrosin, která se může stanovit v plazmě. Je poměr [2H4] Tyrosin na [2H5] Fenylalanin odráží, že část produkce tyrosin, který je vzhledem k oxidaci fenylalaninu. Hlavním omezením tohoto přístupu je, že je třeba kombinovat se zavedením samostatného stopovací látky, např 13C, v molekule tyrosinu pro stanovení celkového Ra tyrosin.

Navzdory skutečnosti, že moderní metody (Například plynová chromatografie s hmotnostní spektrometrií) umožňují určit akumulace izotopu menší než 100 ul plazmy, odběr vzorků krve je obtížné z etických důvodů (v případě nastavení katétru je způsobeno pouze potřebou izotopem infuze, místo zaujme klinické sledování). To se stalo základem pro hledání alternativních metod. Podobné parametry byly získány obohacením [13C] leucinu v plazmě a moči. Později Darling a kol. vykazovaly mírný rozdíl v obohacení plazmě a moči, charakteristika několika aminokyselin. To je možné vysvětlit přítomností významného D- [13C] amino nečistoty jsou komerčně dostupné traceru.

Vzhled z nich nečistoty v moči - výsledkem preferenčního vylučování kyseliny D-aminokyseliny renálními tubuly však zajistí, optická čistota (100%) značených aminokyselin před sběru moči.

K objasnění regulace kinetika proteinu v novorozence leucin kinetiky byla studována za různých podmínek. Bylo zjištěno, že inzulín u kojenců se VLBW, stejně jako u dospělých, inhibuje proteolýzu a snižuje syntézu proteinu. Jak je ukázáno studiemi nedonošených dětí se syndromem respirační tísně, dříve (počínaje prvním dnem života), intravenózní podávání aminokyselin ve srovnání s tradičním infuze glukózy vede pouze ke zlepšení rovnováhy proteinů stimulací jeho syntézy. Reakce k postupnému zvyšování dávky aminokyselin byla klinicky stabilní předčasně narozených dětí v prvním týdnu života, na rozdíl od proteolýze u zdravých termínu kojenců, potlačení závislý na dávce, endogenní Rychlost akumulace leucinu nezávisí na zavedení aminokyselin.

Vzhledem k tomu, glutaminu v roztoku vzhledem nestálý, tradičně používá pro parenterální výživu roztoků aminokyselin, neobsahují glutamin. Navíc, glutamin může být „podmíněně nezbytný“ v situacích, které mají značný stres, například v případě dětí s VLBW dostává parenterální výživu. Bylo zjištěno, že podávání glutaminu obohaceného přípravku pro parenterální výživu redukuje oxidaci leucinu a proteinů kazu u předčasně narozených dětí v parenterální výživě.

Sdílet na sociálních sítích:

Podobné

© 2011—2018 GuruHealthInfo.com