Fagocytární aktivity dendritických buněk. Imunofenotyp dendritických buněk

dendritické buňky, odvozený od buněk kostní dřeně myší byly testovány na schopnost fagocytózy. Fagocytární aktivity DC v různých stádiích diferenciace, aktivovaný Immunovac-PE-4, a klasický induktor ACO zrání TNF-a, byla hodnocena na absorpční proti kmenům S. aureus a S. typhimurium. Jako kontroly byly použity makrofágy, které byly získané ze stejných buněk kostní dřeně jejich kultivací s GM-CSF po dobu 7 dnů.
Nezralé dendritické buňky aktivněji fagocytovány bakterií na rozdíl od DC působí Immunovac-VP-4, ACO a TNF-a.

Fagocytární aktivity makrofágů a dendritických buněk byl zkoumán na dynamice proti S. aureus a S. typhimurium.
Nejaktivnější byly makrofágy, fagocytární index je s ohledem na S. aureus Po 30 minutách inkubace byl 86,0 ± 4,8%, a zůstal na vysoké úrovni po dobu tří hodin pozorování.

fagocytární aktivita nezralé DC stimulovány a imunomodulátory mikrobiálního původu, byly významně odlišné.
Když přidal se k středa kultivaci TNF-a nebo Immunovac-VI-4 (skupiny 2 a 3) se fagocytární aktivita byla významně nižší, s přídavkem Immunovac-VP-4 index fagocytární byla o něco vyšší než v případě, že pod vlivem DC zrání TNF-a. Pod vlivem SOA také ukázala pokles fagocytózy DC, ale jeho hladina byla vyšší než Immunovac-VP-4, které mohou indikovat přítomnost v kultuře nezralých DC a makrofágy. Při srovnání stupně fagocytózy S. aureus a S. TY-phimurium významné rozdíly byly nalezeny.

dobře pravděpodobně, že čím vyšší je aktivita absorpčních bakterie dendritické buňky stimulovány Immunovac-VP-4 a exprese ACO vlivem Toll-like receptorů na DC a makrofágů, které mají afinitu pro patogen asociované struktury bakterií. Po reakci s bakteriální produkty, DC, přenesena do nového funkčního stavu, což se odráží ve snižování fagocytární aktivity a schopnost silnější antigen prezentace ve srovnání s makrofágy.

studovat immunophenotypic charakteristiky dendritických buněk v různých stádiích zrání byly provedeny za použití flyuorestseinizotiotsianat a PE-značené monoklonální protilátky Company, USA «Caltag».

Stupeň diferenciace a Zralé dendritické buňky, odvozený od jaterních buněk embryonálních myších byl stanoven změnou úrovně exprese diferenciačních molekul CD34, CD38, CD40, CD80, CD86, CD83, F4 / 80, MHC I, MHC II po 3 dny po přidání na nezralé dendritické buňky Immunovac-VP-4, bakteriální lyzát K. pneumoniae, nebo TNF-a.

zjištění show , že TNF-a a Immunovac-VP-4 ve studovaných koncentracích stimulovaných DC zrání. Avšak soudě podle exprese diferenciačních markerů, TNF-a aktivovaného DC zrání ve větším rozsahu, než Immunovac-VP-4 lyzátu a K. pneumoniae. Koncentrace 25 ug / ml Immunovac-PE-4 byl optimální pro indukci DK- zrání za těchto podmínek je hladina exprese kostimulačních molekul byla vyšší. Avšak exprese F4 / 80 molekul na DC stimulovány Immunovac-VP-4 a lyzátu K. pneumoniae, zůstala zvýšená (23,8 ± 2,6% a 21,2 ± 3,4%, v daném pořadí) ve srovnání s DC, zpracuje se TNF-a (0,6 ± 0,2%).

Zkoumalo se také, imunofenotyp dendritických buněk, odvozený od buněk kostní dřeně myší. Jak zrání induktory používá imunomodulátory bakteriálního původu - Immunovac-VP-4 GMDP, ASO, a jako kontrola - lyzátu LPS a K. pneumoniae, a TNF-a.

Aktivace buněk přes Immunovac-VI-4 GMDP a vede k maturaci buněk. Zvyšuje expresi kostimulačních molekul, CD38 adhezní molekuly. Tak byly koncentrace, použité Immunovac-PE-4 mělo různé účinky na úrovni MHC. V dávce 25 ug / ml MHC exprese mi bylo 2,7 krát vyšší než v koncentraci 50 ug / ml. exprese MHC II byla vysoká u obou dávek a nemá žádné významné rozdíly. GMDP zvýšený obsah DC vyjádření MHC třídy II.

Použití lyzát K. pneumoniae a LPS zvýšenou hladinu exprese kostimulačních molekul MHC molekuly, které představují antigenní I a II.

Při použití ACO jako induktoru DC zrání markeru CD34 exprese byla významným změnám jako funkce dávky. Jeho dynamika pozorovány pouze při nejvyšších dávkách. Při použití ARF v dávce 0,3 EU / ml zvýšenou CD80 obsahu, CD86, MHC I-exprimujících buněk. Nicméně úroveň CD86 byla nižší, než s jinými látkami ze zrání. Exprese markerového F4 / 80 na stejnosměrný proud, stimulované Immunovac-VI-4 mohou být spojeny s přítomností bakteriálních LPS ve vakcíně. Tyto výsledky jsou potvrzeny údaje o schopnosti DC získaného léčeni LPS, expresní antigeny nejen zralé DC, ale také receptory pro LPS.

následující pokusy Studovali jsme expresi těchto markerů v kombinaci immmunomodulyatorov mikrobiálního původu (IMMP) s TNF-a. Kultivace DC v přítomnosti GM-CSF a IL-4, s přidáním na šestý den 2,5 ng / ml TNF-a a IMMP DC zrání stimulovány ve větší míře, než je dávka TNF-a, a snížené údržby v kultuře makrofágů. Samo o sobě je TNF-a v koncentraci 2,5 ng / ml (skupina 3) neindukuje DC zrání, kdy ve srovnání s kontrolou (skupina 2), CD34 nezralost značkovač byla 5-krát vyšší, F4 / 80 - 11,4 krát. to naznačuje, že existuje značný zájem v kultuře makrofágů. Nicméně, když došlo k koinkubatsii 2,5 ng / ml TNF-a výraz s imunomodulátory zvýšení CD38 adhezní molekuly, kostimulační molekuly CD40, CD80, CD86 a MHC I a třídy II.

zvláště to platí pro ASO, koinkubatsiya od svého TNF-a stimulovat expresi povrchových markerů specifických pro DC. To snižuje CD34 marker, ve srovnání s nezralým DC (skupina 1) o 3,4 krát, zvýšené expresi adhezních molekul CD38 3,2 krát, kostimulačních molekul CD40 38 krát, CD80 a CD86 téměř 9 krát, MHC I, 2, 7 a MHC II 1,5 krát, hladina makrofágů markeru se snížil o 3,6 krát. Po vstupu do kultivace se médium TNF-a a Immunovac-VI-4 je rovněž zjištěno, stimulační účinek, vyjadřující, že se významně zvýšila expresi MHC I a II a snížený obsah F4 / 80 ve srovnání s působením Immunovac-VI-4 ve stejné dávce (tabulka. 7). Podobné výsledky byly získány s kombinací TNF-a (2,5 ng / ml) a GMDP, ale exprese CD40, CD80, CD86 a MHC II, byla větší v případě, že kombinace TNF-a a Immunovac-VP-4.
zjištění show, že zavedení do kultivačního média malé množství TNF-a zvyšuje potenciál DC zrání pod vlivem imunomodulátory mikrobiálního původu.