Syntéza imunoglobulinu těžkého a lehkého řetězce. Jednotná syntéza těžkých a lehkých řetězců protilátek

Zvláštní studie z těchto otázek se provádí pokusy s buňkami lymfatické uzliny imunizovaných králíků (Fleischman, 1967) a myší myelomové buňky (Knopf např. A., 1967), pul-začně značí značka aminokyselina. Po proměnlivých doby inkubace buněk s 3H-leucinu se izolují H řetězce, se štěpí na fragmenty (v případě bromkyanem králičího imunoglobulinu s papainem nebo v případě myelomu imunoglobulinu) a radioaktivita se určí poměrem těchto fragmentů.

Bylo prokázáno, že poměr radioaktivity NH 2-terminální fragment (FD) a COOH-terminální fragment (Fc), je 1-2 minutě nezvedá relativně nízká, zvyšuje na 80% po 8 minutách. Podobné výsledky byly získány při porovnání aktivity NH2- a COOH-terminální peptidy králičího H řetězců. Pozorovaná rozložení impulsů štítku v molekule syntézy H řetězec odpovídá předpokladu jedné ze svého výchozího bodu.

V tomto případě, v první řadě by měly být označeny dostraivalos obvodu části, t. j. peptidy COOH kontsa- postupně radioaktivita NH2- a COOH-terminální peptidy, které mají být vyrovnány, jak bylo zjištěno při pokusech.

Údaje podporující hypotézu syntéza každého řetězu jako celek byly získány ve studiích podobné metody syntézy H- a L-řetězce do bezbuněčného systému (Vassalli e. a., 1971). [Je třeba poznamenat, že toto řešení není vůbec jisté. To znamená, že pozorované nerovnoměrná distribuce štítku může být vysvětlen tím, za předpokladu, že buňka má malý fond V-oblasti COOH-terminální oblasti, který se rychle spojuje s NH2-konce připojené k polyribosomes C oblasti.

Taková možnost je, zejména, To vyplývala z Schubert a Cohn experimentůa který našel v myelomových buňkách půlky syntézu L-řetězce (Schubert, Cohn, 1970). Nicméně, údaje o mimořádné snadností hydrolýzy vazby na L-řetězec působením proteolytických enzymů (Solomon, McLaughlin, 1969), a to i v přítomnosti slabé kyseliny (Fraser např. A., 1972) ukazují, že pozorovaná spíše rozpadu L-řetězce v těchto experimentech, než jeho syntéza ze dvou polovin].

V posledních letech, výstup zahájení syntézy H- a L řetězce z jednoho místa potvrzuje řada nepřímých údajů. Ty zahrnují detekci krve u pacientů s mnohočetným myelomem a moči s „vadné“ H řetězce konzervační pouze 17-18 HN2-terminálu, ale více než 200 COOH-terminální aminokyseliny (Frangione, 1976). Tak, v těchto obvodech 100 zbytky chybí VH oblast 100 zbytků a S-oblast. Je neuvěřitelné, že obě delece došlo před spojením V- a C-geny kódující H-řetězce, v každé z nich samostatně.
Proto je přítomnost takové "vadný‚H řetězce potvrzuje předpoklad jejich syntéze jako celku z jednoho výchozího bodu.

Dalším argumentem je, detekce iniciačního methioninu pouze na NH2-konci prekurzorů L-řetězce (Schechter, Burstein, 1976), a v nepřítomnosti methionyl zbytků 107-109 polohách L-řetězce (Wu Kabát, 1970).

Konečně, data mohou vést k potvrzení tohoto názoru, na velikosti mRNA, kódující syntézu H- a L řetězce odvozené v posledních letech, je přítomnost těchto mRNA do nukleotidů odpovídajících aminokyselinových sekvencí, jako V-, a c-regionech H- a L-řetězce, a možnost izolace mRNA kódující L řetězec z polyribosomes protilátka specificky, že se vysráží jak V-, a na C-domény (Schechter, 1974b).